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Los tejidos endoteliales fueron y luego tratados con atorvastatina en concentraciones entre 0.001 más diez µM, por los periodos indicados en cada experimento. Para analizar la influencia de los metabolitos intermedios en la biosíntesis del colesterol, los tejidos se incubaron junto con atorvastatina uno µM más mevalonato trescientos µM, FPP veinte µM o GGPP veinte µM durante 24 h. Mevalonato, FPP, más GGPP se pusieron en la tradición al mismo tiempo que la atorvastatina. En todas las experiencias se realizaron regulaciones paralelas. Al final de las incubaciones, los sobrenadantes fueron recolectados y congelados a 80 °C. Los tejidos se limpiaron 3 veces junto con PBS más, después de un período de congelación y descongelación, se lisaron junto con 50 µl/pocillo de Triton X-100 al 1%, EDTA cinco mM en PBS, pH siete. cinco, compuestos por PMSF 1 mM, durante 2 h, junto con agitación, a 4 °C.
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Sin embargo, la presencia de cada FPP más GGPP en ausencia de atorvastatina añadida (Fig. 3B) produce una disminución en la liberación de TSP cercana al 20% en ambos casos, sin haber alcanzado significación estadística. En tejidos tratados con atorvastatina, en presencia de FPP más GGPP, aunque revierte en parte la inhibición provocada por atorvastatina, el refuerzo observado no es estadísticamente significativo (fig. 3B). El objetivo de esta función sería determinar el efecto de la atorvastatina en la síntesis y liberación de trombospondina por tejidos endoteliales umbilicales humanos cultivados, así como las reglas alcanzables de los metabolitos en la vía del mevalonato. Un exceso de sustrato podría disminuir el foco en la enzima totalmente libre y alterar la prenilación en la proteína involucrada en la secreción de TSP.
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